Melting Point: Can Your Proteins Take the Heat?

       蛋白質樣品受熱超過一定的溫度會致使蛋白質構型上改變。在高濃度蛋白質溶液體系中,由於分子間無功能性構型折疊(unfolding)趨向於分子尺寸改變,與鄰近分子產生交聯結構,此分子間作用力( protein-protein interaction, PPI)也會致使蛋白質分子產生聚集或團聚現象(aggregation/cluster formation)。此時使用黏度工具,是無法來辨別黏度貢獻僅單純來自於結構/構型上改變。

       低濃度溶液黏度分析上是直接與分子本身構形相關,可作為蛋白質受熱產生相變化或活性性質的觀察工具。但如果使用傳統轉子式及毛細管黏度計作為黏度分析工具,會因低濃度溶液產生局部交聯,溶液中蛋白分子會轉移到疏水性空氣介面上,而面臨分析準確性的挑戰。 

       使用密閉式壓差法黏度計,可明顯觀察到於室溫條件下,樣品黏度值於相轉移點附近有顯著的樣品差異性。同時實驗數據亦顯示增加蛋白質分子表面帶電性,可減少因溫度對蛋白質作用產生聚集或團聚現象。

 

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